Параметры клеточной гибели и пролиферации в клетках рака предстательной железы человека с измененной экспрессией изоформ миозина 1С

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Только для подписчиков

Аннотация

Миозин 1С – мономерный миозиновый мотор с укороченным хвостовым доменом. Такие белки представляют собой медленные «сенсоры натяжения». Три изоформы миозина 1С отличаются по коротким N-концевым последовательностям, функциональные отличия для них не описаны. Изоформа А миозина 1С была описана как диагностический маркер рака предстательной железы, однако ее роль в опухолевой трансформации остается неизвестной. Исходя из данных о функциях миозина 1С, нами была выдвинута гипотеза о потенциальном участии изоформ миозина 1С в поддержании опухолевого фенотипа клеток рака простаты. Мы показали, что снижение уровня экспрессии изоформы С миозина 1С приводит к повышению пролиферативной активности опухолевых клеток предстательной железы.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Е. С. Соломатина

Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта

Email: saidova@mail.bio.msu.ru
Россия, Москва

Е. Н. Нишкомаева

Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта

Email: saidova@mail.bio.msu.ru
Россия, Москва

А. В. Ковалева

Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта; Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова

Email: saidova@mail.bio.msu.ru

Faculty of Biology

Россия, Москва; Москва

А. В. Творогова

Научно-исследовательский институт физико-химической биологии имени А.Н. Белозерского

Email: saidova@mail.bio.msu.ru
Россия, Москва

Д. М. Поташникова

Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта

Email: saidova@mail.bio.msu.ru
Россия, Москва

А. А. Саидова

Институт молекулярной биологии имени В.А. Энгельгардта; Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова

Автор, ответственный за переписку.
Email: saidova@mail.bio.msu.ru
Россия, Москва; Москва

Список литературы

  1. Greenberg M., Lin T., Goldman Y., et al. Myosin IC generates power over a range of loads via a new tension-sensing mechanism // PNAS. 2012. E2433–40.
  2. Bond L., Brandstaetter H., Kendrick-Jones J., et al. Functional roles for myosin 1c in cellular signaling pathways // Cellular signalling. 2013. V. 25. P. 229–235.
  3. Ihnatovych I., Migocka-Patrzalek M., Dukh M., et al. Identification and characterization of a novel myosin Ic isoform that localizes to the nucleus // Cytoskeleton. 2012. V. 69. P. 555–565.
  4. Pestic-Dragovich L., Stojiljkovic L., Philimonenko A., et al. A myosin I isoform in the nucleus // Science. 2000. V. 290. P. 337–341.
  5. Schwab R., Ihnatovych I., Yunus S., et al. Identification of signals that facilitate isoform specific nucleolar localization of myosin IC. // Exp Cell Res. 2013. V. 319. P. 1111–1112.
  6. Tokuo H, Coluccio LM. Myosin-1c regulates the dynamic stability of E-cadherin-based cell-cell contacts in polarized Madin-Darby canine kidney cells. // Mol Biol Cell. 2013. V. 24. P. 2820–2833.
  7. Arif E., Wager M., Johstone D. et al. Motor protein Myo1c is a podocyte protein that facilitates the transport of slit diaphragm protein Neph1 to the podocyte membrane // Molecular and cellular biology. 2011. V. 31. P. 2134–2150.
  8. Diefenbach T., Latham Vol., Yimlamay D. et al. Myosin 1c and myosin IIB serve opposing roles in lamellipodial dynamics of the neuronal growth cone // J Cell Biol. 2002. V. 158. P. 1207–1217.
  9. Bose A., Robida S., Furciitti P. et al. Unconventional myosin Myo1c promotes membrane fusion in a regulated exocytic pathway // Mol Cell Biol. 2004. V. 24. P. 5447–5458.
  10. Stauffer E., Scarborough J., Hirono M. et al. Fast adaptation in vestibular hair cells requires myosin-1c activity // Neuron. 2005. V. 47. P. 541–553.
  11. Ihnatovych I., Sielski N., Hofmann W. Selective expression of myosin IC Isoform A in mouse and human cell lines and mouse prostate cancer tissues // PlosOne. 2014. V. 9. P. e108609.
  12. Saidova A., Potashinkova D., Tvorogova A. et al. Specific and reliable detection of Myosin 1C isoform A by RTqPCR in prostate cancer cells // Peer J. 2018. V. 6. P. e5970.
  13. Saidova A., Potashinkova D., Tvorogova A. et al. Myosin 1C isoform A is a novel candidate diagnostic marker for prostate cancer // Plos One. 2021. V. 16. P. e0251961.
  14. Vandesompele J., De Preter K., Pattyn F. et al. Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multiple internal control genes // Genome Biol. 2002. V. 3. P. research0034.1.
  15. Potashnikova D., Golyshev S., Penin A. et al. FACS Isolation of Viable Cells in Different Cell Cycle Stages from Asynchronous Culture for RNA Sequencing // Methods Mol Biol. 2018. V. 1745. P. 315–335.
  16. Potashnikova D., Saidova A., Tvorogova A. et al. Non-linear Dose Response of Lymphocyte Cell Lines to Microtubule Inhibitors // Front Pharmacol. 2019. V. 10. P. 436.
  17. Brandstaetter H., Kishi-Itakura C., Tumbarello D., et al. Loss of functional MYO1C/myosin 1c, a motor protein involved in lipid raft trafficking, disrupts autophagosome-lysosome fusion // Autophagy. 2014. V. 10. P. 2310–2323.
  18. Hanahan D., Weinberg R. Hallmarks of cancer: the next generation // Cell. 2011. V. 144. P. 646–674.
  19. Ouderkirk J., Krendel M. Non‐muscle myosins in tumor progression, cancer cell invasion, and metastasis // Cytoskeleton. 2014. V. 71. P. 447–463.
  20. Tiwari A., Jung J., Inamdar S. et al. The myosin motor Myo1c is required for VEGFR2 delivery to the cell surface and for angiogenic signaling // Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2013. V. 304. P. H687–H696.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать
2. Рис. 1. Экспрессия изоформ миозина 1С в модельных клеточных линиях. а – уровень экспрессии мРНК изоформ А и С миозина 1С в контроле (1), при добавлении миРНК к изоформе А миозина 1С (2) и при добавлении миРНК к изоформе С миозина 1С (3). Показаны средние и стандартные отклонения, данные нормализованы по референтным генам YWHAZ, GAPDH и HPRT1; приведено 5 независимых экспериментов. б – экспрессия изоформ А и С миозина 1С в клетках LNCaP в контроле и при добавлении доксициклина (Dox). I – окрашивание антителами к пан-миозину 1С, II – окрашивание антителами к метке FLAG, III – окрашивание антителами к α-тубулину; 1 – контроль, 2 – линия FLAG-Myo1C-isoA, 3 – линия FLAG-Myo1C-isoC.

Скачать (133KB)
Метаданные
3. Рис. 2. Основные параметры пролиферации и клеточной гибели в клеточной линии рака простаты РС-3 в контроле (1), при подавлении экспрессии изоформы А миозина 1С (2) и при подавлении экспрессии изоформы С миозина 1С (3). а – гистограммы распределения клеток по клеточному циклу. б – представленность Ki-67+ клеток в образцах. в - гистограммы распределения клеток по стадиям клеточной гибели. Приведено 3 независимых эксперимента, * – достоверные различия между группами, р<0.05, тест Краскелла-Уоллиса, пост-тест Данна.

Скачать (209KB)
Метаданные
4. Рис. 3. Основные параметры пролиферации и клеточной гибели в клеточной линии рака простаты LNCaP 3 в кон- троле (1), при гиперэкспрессии изоформы А миозина 1С (2) и при гиперэкспрессии изоформы С миозина 1С (3). а – гистограммы распределения клеток по клеточному циклу. б – представленность Ki‑67+ клеток в образцах. в –ги- стограммы распределения клеток по стадиям клеточной гибели. Приведено 3 независимых эксперимента, * – досто- верные различия между группами, р < 0.05, тест Краскелла–Уоллиса, пост-тест Данна.

Скачать (204KB)
Метаданные

© Российская академия наук, 2024