Оценка устойчивости методики электрофореза в полиакриламидном геле с натрия додецилсульфатом при определении молекулярной массы белков на модели интерферона альфа-2b
| Dublin Core | PKP Metadata Items | Metadata for this Document | |
| 1. | Title | Title of document | Оценка устойчивости методики электрофореза в полиакриламидном геле с натрия додецилсульфатом при определении молекулярной массы белков на модели интерферона альфа-2b |
| 2. | Creator | Author's name, affiliation, country | Наталья Леонидовна Иванютина; Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Russian Federation |
| 2. | Creator | Author's name, affiliation, country | Степан Игоревич Довбыш; Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Russian Federation |
| 2. | Creator | Author's name, affiliation, country | Виталина Витальевна Ножко; Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Russian Federation |
| 2. | Creator | Author's name, affiliation, country | Елизавета Викторовна Эльберт; Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Russian Federation |
| 2. | Creator | Author's name, affiliation, country | Рауза Асхатовна Волкова; Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации; Russian Federation |
| 3. | Subject | Discipline(s) | |
| 3. | Subject | Keyword(s) | электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия; молекулярная масса белка; концентрация геля; набор маркеров молекулярной массы; стандартные образцы; устойчивость; прецизионность; правильность; изменение условий электрофореза |
| 4. | Description | Abstract | Введение. Для оценки качества биологических лекарственных средств (БЛС) применяют различные условия электрофореза в полиакриламидном геле с натрия додецилсульфатом (ПААГ с ДСН), что обусловливает актуальность изучения устойчивости результатов оценки количественных показателей, например оценки молекулярной массы целевого белка, в зависимости от условий проведения испытаний. Цель. Исследовать устойчивость результатов определения молекулярной массы белка методом электрофореза в ПААГ с ДСН при оценке подлинности, в том числе по изменению правильности, прецизионности и диапазона линейности, в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи Российской Федерации. Материалы и методы. Электрофорез в восстанавливающих условиях проводили в условиях повторяемости два оператора в трис-глициновых гелях (три варианта концентрации) и в коммерческом бис-трис геле с использованием пяти наборов маркеров молекулярной массы и интерферона альфа-2b (ФСО.3.2.00455). Учет результатов осуществляли в программе ImageLab системы ChemiDoc. Для оценки устойчивости рассчитывали прецизионность и правильность результатов определения молекулярной массы. Результаты. При оценке устойчивости результатов определения молекулярной массы интерферона альфа-2b методом электрофореза в ПААГ с ДСН выявлена вариабельность результатов в зависимости от состава используемого геля и набора маркеров молекулярной массы белка: относительное стандартное отклонение — RSD (прецизионность) результатов находилось в диапазоне от 0.6–0.9 до 8.5–8.6%, смещение относительно номинального значения молекулярной массы (правильность) — в диапазоне от 0.1–0.2 до 4.7–5.4 кДа. Выводы. Выявленная при оценке устойчивости вариабельность результатов определения молекулярной массы интерферона альфа-2b свидетельствует о необходимости подтверждения правильности и прецизионности методики при внесении изменений в условия проведения электрофореза в отношении концентрации геля и набора маркеров молекулярной массы белков. Использование метода электрофореза в ПААГ с ДСН для оценки подлинности белка только по значению молекулярной массы без оценки соответствия стандартному образцу, аттестованному в установленном порядке, неинформативно. |
| 5. | Publisher | Organizing agency, location | The Russian Academy of Sciences |
| 6. | Contributor | Sponsor(s) | |
| 7. | Date | (DD-MM-YYYY) | 05.11.2024 |
| 8. | Type | Status & genre | Peer-reviewed Article |
| 8. | Type | Type | Research Article |
| 9. | Format | File format | |
| 10. | Identifier | Uniform Resource Identifier | https://rjpbr.com/0044-4618/article/view/668085 |
| 10. | Identifier | Digital Object Identifier (DOI) | 10.31857/S0044461824040029 |
| 10. | Identifier | eLIBRARY Document Number (EDN) | FXFGVX |
| 11. | Source | Title; vol., no. (year) | Žurnal prikladnoj himii; Vol 97, No 4 (2024) |
| 12. | Language | English=en | ru |
| 13. | Relation | Supp. Files |
Fig. 1. Typical electropherogram of proteins of different sets of molecular weight markers and interferon alpha-2b in 12% Tris-glycine polyacrylamide gel (the separating gel is shown in the image): a — in a gel measuring 16 × 20 cm; b — in a gel measuring 8.3 × 7.3 cm. (643KB) Fig. 2. Determination of the molecular weight of interferon alpha-2b (mean and standard deviation) using different gels and different sets of molecular weight marker proteins. (1MB) Fig. 3. Molecular mass of interferon alpha-2b (box-and-whisker plot), calculated: a — in different types of gels, b — using a calibration graph based on different sets of molecular mass markers. Designation of gel types: T-12% — 12% Tris-glycine gels, T-14% — 14% Tris-glycine gels, T(4–20)% — Tris-glycine gels with a concentration gradient of 4–20%, B(4–12)% — Bis-Tris gels with a concentration gradient of 4–12%. (50KB) |
| 14. | Coverage | Geo-spatial location, chronological period, research sample (gender, age, etc.) | |
| 15. | Rights | Copyright and permissions |
Copyright (c) 2024 Russian Academy of Sciences |